MichaelR.Lappin,DVM,PhD,Dipl.ACVIM(InternalMedicine)
细胞学检查对渗出液、骨髓抽吸物、血涂片、滑液、胃活检、十二指肠分泌物、尿液、前列腺液、呼吸道冲洗液、粪便涂片、组织印压和细针抽吸活检是发现感染病原体的一种廉价且极有价值的方法。
一些感染性病原体通过细胞学即可获得确诊。目前已不再推荐在细菌培养和药敏试验结果之前，通过细菌形态和革兰氏染色去辅助选择经验性使用抗生素，因为不够准确。
对于大多数感染性病原体，最好是薄膜血涂片。制备方法如下：第二张载玻片的末端与第一张表面成30度角，回拉进入血滴中。第二张玻片的角度可以调整，以适应不同动物血液粘稠度的变化。当血液沿推玻片前端几乎扩散到最大宽度时，再以稳定、均匀、快速的动作向前推进。应该在空气中轻轻摆动载玻片，让它迅速风干。经过适当处理的血涂片很薄，细胞分布均匀。如果是血液以外的其他样本，将推玻片轻轻地放在样本上方；然后在平行平面上平稳而快速地拉开玻片(拉动涂抹)。呼吸道冲洗液、前列腺液、尿液、房水和脑脊液(CSF)中的细胞应在染色前以g离心5分钟。如果可能的话，应该总是制作多张载玻片。制作载玻片后，样本在室温下风干，根据所需的程序进行固定，染色。不需立即染色的载玻片应浸入%甲醇中固定，并风干。
细胞学标本可以用常规染液进行染色；可以使用针对某些病原体的免疫细胞化学技术。在小动物实验中，传染病诊断的常规染色方法包括瑞氏-吉姆萨染色、Diff-Quik染色、革兰氏染色和抗酸染色。免疫细胞化学技术(例如，猫白血病病*的骨髓细胞的荧光抗体染色)仅在专业实验室操作。
细菌性疾病
如果怀疑是细菌性疾病，则在无菌条件下收集样本，并初步处理以培养。在准备好细胞学评估涂片后，通常首先用瑞氏-吉姆萨或Diff-Quik染色。
如果发现细菌，用另一张玻片革兰氏染色来区分革兰氏阳性和革兰氏阴性。如果发现丝状、革兰氏阳性杆菌，抗酸染色有助于区分放线菌(不具有抗酸)和诺卡氏菌(一般具有抗酸)。如果检测到巨噬细胞或中性粒细胞，则应抗酸染色以检测在细胞质内的分枝杆菌；分枝杆菌经常可以在Diff-Quik或瑞氏-吉姆萨染色的载玻片上看到(参见图1)。细菌可以少量存在，也可以存在于细胞内(巴尔通体)，因此细胞学角度未发现微生物并不能完全排除。中性粒细胞或巨噬细胞增高的所有样本应该考虑细菌培养。
一些微生物，如支原体，在细胞学上很少有记录，而其他微生物需要特殊的染色才能获得最佳的可视化。对一些人来说，细菌培养从来没有成功过。例如，可以在红细胞(RBC)表面检测到狗和猫的嗜血支原体(以前称为猫血巴尔通体和犬血巴尔通体)，但从未成功培养过。在分子诊断技术出现之前，感染记录仅基于细胞学；瑞氏-吉姆萨染色是临床上对这些微生物的最佳染色方法。然而，基于细胞学的假阴性结果很常见。因此，如果高度怀疑，应该考虑在细胞学阴性的病例中采用分子诊断技术。
图1一个患有结核病的2岁雪纳瑞犬的脾脏细针抽吸物的镜检。巨噬细胞中的未染色的棒状包涵体是鸟分枝杆菌（×0）。
立克次体病
无形体（图2）和埃立克体，偶尔会在外周血、淋巴结抽吸物、骨髓抽吸物或滑液的细胞质中发现。这些病原的桑椹胚可以在不同的细胞类型中找到。在显示桑椹胚方面，瑞氏-吉姆萨染色优于瑞氏或Diff-Quik染色。可以用免疫荧光抗体染色来标记血管内皮细胞中的立克次体。
图2实验室感染的猫吞噬细胞中的无形体桑葚胚（箭头）
真菌病
皮肤癣菌的节生孢子和分生孢子可以通过细胞学鉴定。取病变部位周边的毛发，用10%-20%的氢氧化钾滴在显微镜载玻片上来清除杂质。然后将玻片加热，但不能沸腾，并检查是否有皮肤真菌。所有患有慢性，渗出性皮肤损伤的猫在病变处做印压涂片，并用瑞氏-吉姆萨染色，然后在显微镜下检查单核细胞胞质内特征性的圆形、椭圆形或雪茄状申克氏孢子丝状酵母相(见图3)。高碘酸希夫氏染色对真菌的显示要优于瑞氏-吉姆萨染色。
图3申克孢子丝菌引起的猫皮肤病变。
皮肤寄生虫病
姬螯螨、蠕形螨、痒螨、疥螨、耳螨是小动物最常见的皮肤寄生虫。确诊需要基于微生物的细胞学诊断。姬螯螨的诊断是通过将一块透明胶带压在结痂的区域上，然后将胶带放在载玻片上，做显微镜检查。蠕形螨最常见于皮肤深层刮片和毛囊渗出物；姬螯螨、痒螨和疥螨在更宽、更浅的刮片中更容易被检测到。耳螨和虫卵在耳道渗出物中更容易被检测到。
全身性原虫病
这些病原体的细胞学诊断是推定或确诊该病的方法。利什曼原虫、克氏锥虫、巴贝斯虫、美洲肝虫和猫胞簇虫应采用血涂片瑞氏-吉姆萨或吉姆萨染色。从耳缘血管采集血液可能会增加在血液中发现原虫的机会，特别是巴贝斯虫和猫胞簇虫。弓形虫和犬新孢子虫可引起犬类似的症状，而它们的速殖子在形态上很难区分；需要免疫细胞化学染色或聚合酶链式反应来区分这些病原体。这些原虫也可以通过评估血清转换来区分，因为抗体对每种病原体都是特异的。有关这些疾病的更多资料，请